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支原体核酸检测方法比较

发布时间:2023-12-08浏览量: 来源:


肺炎支原体(Mycoplasma Pneumoniae,MP)是呼吸道感染的最常见病原体之一。近些年来 MP 感染呈现了许多不同以往的特点,如:药物效果差,感染年龄低龄化,婴幼儿感染增多。既往认为大环内醋类抗生素对大多数 MP 感染有效,但近年耐药菌株增多,药物效果变差。因此,早期、准确的检测MP 对支原体肺炎的诊断和治疗具有重要的临床意义。

MP 感染临床表现缺乏特异性,易与病毒感染相混淆。临床常用的 MP 检测方法有血清学检测方法、DNA 荧光定量扩增和近年出现的荧光恒温扩增技术(Simultaneous Amplification and Test,SAT),近几年国内外的指南都将核酸检测列入了诊断 MP 感染的病原学依据中。

开封市儿童医院检验科积极学习新技术,及时开展了支原体核酸检测,那这几种方法有什么联系和区别呢?

通过参考文献发现对于不同年龄的儿童和不同病程的儿童推荐支原体检测的方法:

年龄因素:


 1岁以下组应用支原体DNA核酸检测阳性检出率高,推测原因可能为婴儿自身免疫系统尚不完善,针对病原的感染不能激发机体的特异性免疫应答反应,在MP 感染情况下也可不产生MP-IgM 抗体或者感染 MP 后因MP-IgM 抗体效价较低不易被检出,而分子生物学方法检测则受年龄的影响小。故1 岁以下年龄段患儿应首选鼻咽部分泌物PCR 法检测 MP-DNA,不仅取样方便,无创伤,且检出率较高。

病程:


MP-DNA 检出率在病程 10 天以内随着时间的增加阳性检出率上升,此后随着病程的延长,MP-DNA 的阳性检出率逐渐下降。因MP-DNA 采用荧光定量PCR方法,具有高灵敏度和高特异性的特点,对于患病初期的患儿应用MP-DNA 检测更易明确病因。

MP-SAT阳性率随入院治疗时间的延长显著降低,治疗 3周时点其阳性率明显下降,在入院后 < 24 h 和 1 周内的阳性率明显高于传统的血清 MP-Ab抗体检测。

有研究对MP的 RNA和DNA的检测在儿童支原体感染诊断中的应用效果进行了评价比较,结果MP-SAT检测诊断儿童MP感染的灵敏度、特异度、准确性高于MP-DNA法检测。显示在儿童支原体感染的早期诊断中,RNA实时检测相对而言检测的灵敏度和准确性更高,应用价值良好[1]。

联合检测MP-DNA+MP-RNA可以推断病程,判断预后。

标本MP-DNA检测结果为阳性,而MP-RNA检测结果为阴性的,是由于患儿处于MP肺炎的恢复期,MP死亡后RNA可以很快降解,而DNA还会存在一段时间,最长可达7个月。故联合检测MP-DNA+MP-RNA可以推断病程,判断预后。

MP 的检测方法中有血清学检测、抗原检测以及核酸检测等方法,其中一种检测方法不能可靠地检测出所有感染,尤其是在儿童中。因此,为了能够早期诊断MP 感染可选择两种检测方法,如结合血清学IgM 和实时 PCR(DNA 或者RNA)。

参考文献:

[ 1 ]林苗苗,施李芬,余坚,等.肺炎支原体 RNA和DNA检测技术对儿童肺炎支原体肺炎诊断的价值 [J].中国妇幼保健 ,2018 ,33 ( 5 ) :1054-1056 .

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